氨基酸測定儀是一種用于分析和測量樣品中氨基酸含量的儀器。其工作原理基于氨基酸的特性以及化學(xué)反應(yīng)原理。
 

　　氨基酸是構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本組成單元，其分子結(jié)構(gòu)包含一個氨基基團(tuán)(NH2)和一個羧基(COOH)，以及與中央碳原子連接的側(cè)鏈。氨基酸的種類很多，每種氨基酸的側(cè)鏈結(jié)構(gòu)各不相同，這決定了它們在化學(xué)性質(zhì)上的差異。
 

　　氨基酸測定儀主要基于以下兩種方法進(jìn)行氨基酸的測定：色譜法和光度法。
 

　　1、色譜法：
 

　　(1)樣品準(zhǔn)備：首先，將待測樣品進(jìn)行處理，通常需要將樣品中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為氨基酸。這可以通過酸水解或酶催化反應(yīng)來實(shí)現(xiàn)。
 

　　(2)色譜分離：處理后的樣品被注入到氨基酸分析柱中，其中氨基酸分離根據(jù)不同的物理性質(zhì)進(jìn)行。常見的方法是離子交換色譜和高效液相色譜(HPLC)。在這些色譜柱中，氨基酸根據(jù)側(cè)鏈的性質(zhì)以不同速度通過，從而實(shí)現(xiàn)分離。
 

　　(3)檢測：分離出的氨基酸在檢測器中被定量檢測。常用的檢測方法有紫外光譜法(UV)和熒光檢測法。這些方法利用氨基酸結(jié)構(gòu)上特定的吸收或發(fā)射特性來確定其濃度。
 

　　2、光度法：
 

　　(1)反應(yīng)原理：常用的反應(yīng)是二氨基萘-2-磺酸(DNS)法。該方法基于氨基酸與DNS試劑之間的反應(yīng)。在堿性條件下，DNS試劑會與氨基酸中的羧基和氨基發(fā)生反應(yīng)，生成帶有強(qiáng)吸收的產(chǎn)物。這種產(chǎn)物的濃度與樣品中的氨基酸含量成正比。
 

　　(2)測定步驟：樣品先經(jīng)過蛋白質(zhì)水解處理，然后與DNS試劑混合，在高溫條件下進(jìn)行反應(yīng)。反應(yīng)完成后，通過光度計測量產(chǎn)物的吸光度，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線相比較，從而確定樣品中氨基酸的含量。
 

　　總結(jié)起來，氨基酸測定儀的工作原理基于氨基酸的特性以及不同化學(xué)反應(yīng)的原理。通過有效的樣品處理、分離和檢測方法，可以準(zhǔn)確測量樣品中氨基酸的含量，從而對生化研究、食品分析、臨床診斷等領(lǐng)域提供重要的信息和數(shù)據(jù)。